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細胞粘附實驗

產品介紹

細胞粘附實驗實驗原理
細胞粘附實驗通常分為兩類,即細胞與細胞粘附和細胞與基質粘附。機體內許多細胞,如上皮細胞固定在某處發揮功能;另一些細胞,如白細胞,活躍運動,就需要不斷調節細胞粘附。細胞粘附性的改變在腫瘤轉移過程中也發揮著重要作用。惡性腫瘤具有從原發瘤分離及在體內擴散的能力,提示這些細胞相互識別及粘附機制發生了改變。用到測定細胞粘附性的實驗有:機械法測定細胞粘附性,發射性核素法測定細胞粘附性,細胞分離實驗和腫瘤細胞聚集體形成實驗。

實驗步驟
試劑:FN纖連蛋白,BSA試劑,96孔板,MTT或CCK-8試劑
1.用10 µg/ml的FN預鋪96孔板,70 µL/孔,4℃后,PBS洗3遍,再用1% BSA于37℃封閉1 h,PBS洗3遍
2.待測細胞培養至對數生長期,消化細胞,用無血清培養基懸浮細胞,用血球計數板計數,調整濃度為5*105/mL分別接種于預鋪FN的96孔板中,每孔5000個細胞,每組設3個復孔。37 ℃孵育1 h后,PBS洗去未黏附的細胞。

檢測方法
方法1:3.5%戊二醛于4 ℃固定0.5 h,PBS 洗3遍;0.1%的結晶紫染色,室溫靜止0.5 h,PBS洗3 遍,每孔加入100 μL 10%的乙酸,5~10 min后用酶標儀檢測595 nm的吸光度值,用以表示黏附細胞的多少。
方法2:按照每孔加入100 µL甲醇,固定15 min每孔加入100 µL吉姆薩染液,染色15 min,PBS洗去染液倒置顯微鏡下隨機取5個隨機視野計數粘附細胞數量病拍照,統計結果。
方法3:MTT法或CCK-8檢測細胞量。

客戶需要提供
1 客戶提供實驗分組情況及實驗背景資料,有具體要求請事先說明;
2 細胞株(也可以由我們提供)、干預因素原料;
3 干預藥物及濃度。

目前,上海劍鈍生物科技有限公司,主營實驗技術服務、服務、動物模型構建、細胞株、elisa試劑盒等,歡迎廣大科研愛好者前來咨詢選購!

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